మోడిక్ మార్పుల జంతు నమూనాను సృష్టించడానికి కటి ఉపమృదులాస్థి ఎముకలోకి స్వయంజనిత కేంద్రక పల్పోసస్‌ను అమర్చడం

Nature.comను సందర్శించినందుకు ధన్యవాదాలు. మీరు ఉపయోగిస్తున్న బ్రౌజర్ వెర్షన్‌లో CSS మద్దతు పరిమితంగా ఉంది. ఉత్తమ ఫలితాల కోసం, కొత్త బ్రౌజర్‌ను ఉపయోగించమని (లేదా ఇంటర్నెట్ ఎక్స్‌ప్లోరర్‌లో కంపాటిబిలిటీ మోడ్‌ను నిలిపివేయమని) మేము సిఫార్సు చేస్తున్నాము. ఈలోగా, మద్దతు కొనసాగేలా చూసేందుకు, మేము ఈ సైట్‌ను స్టైల్స్ మరియు జావాస్క్రిప్ట్ లేకుండా ప్రదర్శిస్తాము.
మోడిక్ మార్పు (MC) యొక్క జంతు నమూనాలను స్థాపించడం MCని అధ్యయనం చేయడానికి ఒక ముఖ్యమైన ఆధారం. యాభై నాలుగు న్యూజిలాండ్ వైట్ కుందేళ్ళను షామ్-ఆపరేషన్ గ్రూప్, కండర ఇంప్లాంటేషన్ గ్రూప్ (ME గ్రూప్) మరియు న్యూక్లియస్ పల్పోసస్ ఇంప్లాంటేషన్ గ్రూప్ (NPE గ్రూప్)గా విభజించారు. NPE గ్రూప్‌లో, యాంటెరోలేటరల్ లంబార్ సర్జికల్ విధానం ద్వారా ఇంటర్‌వెర్టెబ్రల్ డిస్క్‌ను బహిర్గతం చేసి, ఎండ్ ప్లేట్ దగ్గర L5 వెన్నుపూస భాగంలోకి సూదితో రంధ్రం చేశారు. L1/2 ఇంటర్‌వెర్టెబ్రల్ డిస్క్ నుండి సిరంజి ద్వారా NPని సంగ్రహించి, దానిలోకి ఇంజెక్ట్ చేశారు. సబ్‌కాండ్రల్ ఎముకలో రంధ్రం చేశారు. కండర ఇంప్లాంటేషన్ గ్రూప్ మరియు షామ్-ఆపరేషన్ గ్రూప్‌లలో శస్త్రచికిత్సా విధానాలు మరియు రంధ్రం చేసే పద్ధతులు NP ఇంప్లాంటేషన్ గ్రూప్‌లో ఉన్న వాటిలాగే ఉన్నాయి. ME గ్రూప్‌లో, రంధ్రంలో ఒక కండరపు ముక్కను ఉంచగా, షామ్-ఆపరేషన్ గ్రూప్‌లో రంధ్రంలో ఏమీ ఉంచలేదు. ఆపరేషన్ తర్వాత, MRI స్కానింగ్ మరియు మాలిక్యులర్ బయోలాజికల్ పరీక్షలు నిర్వహించబడ్డాయి. NPE సమూహంలో సిగ్నల్ మారింది, కానీ షామ్-ఆపరేషన్ సమూహం మరియు ME సమూహంలో స్పష్టమైన సిగ్నల్ మార్పు లేదు. హిస్టోలాజికల్ పరిశీలనలో ఇంప్లాంటేషన్ ప్రదేశంలో అసాధారణ కణజాల వృద్ధి కనిపించిందని, మరియు NPE సమూహంలో IL-4, IL-17 మరియు IFN-γ యొక్క వ్యక్తీకరణ పెరిగిందని తేలింది. సబ్‌కాండ్రల్ ఎముకలోకి NP ఇంప్లాంటేషన్ MC యొక్క జంతు నమూనాను ఏర్పరచగలదు.
మోడిక్ మార్పులు (MC) అనేవి మాగ్నెటిక్ రెసొనెన్స్ ఇమేజింగ్ (MRI)లో కనిపించే వెన్నుపూసల చివరి పలకలు (వెర్టెబ్రల్ ఎండ్‌ప్లేట్స్) మరియు వాటికి ఆనుకుని ఉన్న ఎముక మజ్జలో ఏర్పడే గాయాలు. సంబంధిత లక్షణాలు ఉన్న వ్యక్తులలో ఇవి చాలా సాధారణం¹. నడుము నొప్పి (LBP)²,3తో దీనికి ఉన్న సంబంధం కారణంగా, అనేక అధ్యయనాలు MC యొక్క ప్రాముఖ్యతను నొక్కి చెప్పాయి. డి రూస్ మరియు ఇతరులు⁴ మరియు మోడిక్ మరియు ఇతరులు⁵ స్వతంత్రంగా వెన్నుపూస ఎముక మజ్జలో మూడు విభిన్న రకాల సబ్‌కాండ్రల్ సిగ్నల్ అసాధారణతలను మొదటిసారిగా వివరించారు. మోడిక్ టైప్ I మార్పులు T1-వెయిటెడ్ (T1W) సీక్వెన్స్‌లలో హైపోఇంటెన్స్‌గా మరియు T2-వెయిటెడ్ (T2W) సీక్వెన్స్‌లలో హైపర్‌ఇంటెన్స్‌గా ఉంటాయి. ఈ గాయం ఎముక మజ్జలో చీలిక చివరి పలకలను మరియు వాటికి ఆనుకుని ఉన్న వాస్కులర్ గ్రాన్యులేషన్ కణజాలాన్ని వెల్లడిస్తుంది. మోడిక్ టైప్ II మార్పులు T1W మరియు T2W సీక్వెన్స్‌లు రెండింటిలోనూ అధిక సిగ్నల్‌ను చూపుతాయి. ఈ రకమైన గాయంలో, చివరి పలకల విధ్వంసం, అలాగే దానికి ఆనుకుని ఉన్న ఎముక మజ్జలో హిస్టోలాజికల్ కొవ్వు భర్తీని కనుగొనవచ్చు. మోడిక్ టైప్ III మార్పులు T1W మరియు T2W సీక్వెన్స్‌లలో తక్కువ సిగ్నల్‌ను చూపుతాయి. ఎండ్‌ప్లేట్‌లకు సంబంధించిన స్క్లెరోటిక్ గాయాలు గమనించబడ్డాయి6. MC వెన్నెముక యొక్క రోగలక్షణ వ్యాధిగా పరిగణించబడుతుంది మరియు వెన్నెముక యొక్క అనేక క్షీణత వ్యాధులతో దగ్గరి సంబంధం కలిగి ఉంటుంది7,8,9.
అందుబాటులో ఉన్న డేటాను పరిగణనలోకి తీసుకుంటే, అనేక అధ్యయనాలు MC యొక్క కారణాలు మరియు వ్యాధి సంబంధిత యంత్రాంగాలపై వివరణాత్మక అంతర్దృష్టులను అందించాయి. ఆల్బర్ట్ మరియు ఇతరులు డిస్క్ హెర్నియేషన్ వల్ల MC సంభవించవచ్చని సూచించారు8. హు మరియు ఇతరులు తీవ్రమైన డిస్క్ క్షీణతను MCకి కారణంగా పేర్కొన్నారు10. క్రోక్ "అంతర్గత డిస్క్ చీలిక" అనే భావనను ప్రతిపాదించారు, దీని ప్రకారం పదేపదే డిస్క్‌కు కలిగే గాయం ఎండ్‌ప్లేట్‌లో సూక్ష్మ చీలికలకు దారితీయవచ్చు. చీలిక ఏర్పడిన తర్వాత, న్యూక్లియస్ పల్పోసస్ (NP) ద్వారా ఎండ్‌ప్లేట్ నాశనం కావడం ఒక ఆటోఇమ్యూన్ ప్రతిస్పందనను ప్రేరేపించవచ్చు, ఇది మరింతగా MC అభివృద్ధికి దారితీస్తుంది11. మా మరియు ఇతరులు కూడా ఇదే విధమైన అభిప్రాయాన్ని పంచుకున్నారు మరియు NP-ప్రేరిత ఆటోఇమ్యూనిటీ MC యొక్క వ్యాధిజననంలో కీలక పాత్ర పోషిస్తుందని నివేదించారు12.
రోగనిరోధక వ్యవస్థ కణాలు, ముఖ్యంగా CD4+ T హెల్పర్ లింఫోసైట్లు, ఆటోఇమ్యూనిటీ యొక్క వ్యాధిజననంలో కీలక పాత్ర పోషిస్తాయి¹³. ఇటీవల కనుగొనబడిన Th17 ఉపసమితి, ప్రోఇన్‌ఫ్లమేటరీ సైటోకైన్ IL-17ను ఉత్పత్తి చేస్తుంది, కీమోకైన్ వ్యక్తీకరణను ప్రోత్సహిస్తుంది మరియు దెబ్బతిన్న అవయవాలలోని T కణాలను IFN-γ ఉత్పత్తి చేయడానికి ప్రేరేపిస్తుంది¹⁴. రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనల వ్యాధిజననంలో Th2 కణాలు కూడా ఒక ప్రత్యేక పాత్ర పోషిస్తాయి. ఒక ప్రతినిధి Th2 కణంగా IL-4 యొక్క వ్యక్తీకరణ తీవ్రమైన ఇమ్యునోపాథలాజికల్ పరిణామాలకు దారితీయవచ్చు¹⁵.
MC16,17,18,19,20,21,22,23,24 పై అనేక క్లినికల్ అధ్యయనాలు నిర్వహించబడినప్పటికీ, మానవులలో తరచుగా సంభవించే MC ప్రక్రియను అనుకరించగల మరియు దాని కారణాలను లేదా టార్గెటెడ్ థెరపీ వంటి కొత్త చికిత్సలను పరిశోధించడానికి ఉపయోగపడే తగిన జంతు ప్రయోగాత్మక నమూనాల కొరత ఇప్పటికీ ఉంది. ఇప్పటి వరకు, అంతర్లీన రోగనిర్ధారణ యంత్రాంగాలను అధ్యయనం చేయడానికి MC యొక్క కొన్ని జంతు నమూనాలు మాత్రమే నివేదించబడ్డాయి.
ఆల్బర్ట్ మరియు మా ప్రతిపాదించిన ఆటోఇమ్యూన్ సిద్ధాంతం ఆధారంగా, ఈ అధ్యయనం డ్రిల్ చేయబడిన వెన్నుపూస చివరి పలక సమీపంలో NPని ఆటోట్రాన్స్‌ప్లాంట్ చేయడం ద్వారా ఒక సరళమైన మరియు పునరుత్పత్తి చేయగల కుందేలు MC నమూనాను ఏర్పాటు చేసింది. జంతు నమూనాల హిస్టోలాజికల్ లక్షణాలను పరిశీలించడం మరియు MC అభివృద్ధిలో NP యొక్క నిర్దిష్ట యంత్రాంగాలను మూల్యాంకనం చేయడం ఇతర లక్ష్యాలు. ఈ లక్ష్యాలను సాధించడానికి, మేము MC పురోగతిని అధ్యయనం చేయడానికి మాలిక్యులర్ బయాలజీ, MRI మరియు హిస్టోలాజికల్ అధ్యయనాల వంటి పద్ధతులను ఉపయోగిస్తాము.
శస్త్రచికిత్స సమయంలో రక్తస్రావం వల్ల రెండు కుందేళ్ళు మరణించగా, MRI సమయంలో మత్తుమందు ఇవ్వడం వల్ల నాలుగు కుందేళ్ళు మరణించాయి. మిగిలిన 48 కుందేళ్ళు బ్రతికి, శస్త్రచికిత్స తర్వాత ఎటువంటి ప్రవర్తనా లేదా నాడీ సంబంధిత లక్షణాలను చూపించలేదు.
వివిధ రంధ్రాలలో అమర్చిన కణజాలం యొక్క సిగ్నల్ తీవ్రత భిన్నంగా ఉందని MRI చూపిస్తుంది. NPE సమూహంలో L5 వెన్నుపూస యొక్క సిగ్నల్ తీవ్రత చొప్పించిన 12, 16 మరియు 20 వారాల తర్వాత క్రమంగా మారింది (T1W సీక్వెన్స్ తక్కువ సిగ్నల్‌ను చూపింది, మరియు T2W సీక్వెన్స్ మిశ్రమ సిగ్నల్ మరియు తక్కువ సిగ్నల్‌ను చూపింది) (Fig. 1C), అయితే అదే కాలంలో ఇతర రెండు సమూహాల అమర్చిన భాగాల MRI స్వరూపాలు సాపేక్షంగా స్థిరంగా ఉన్నాయి (Fig. 1A, B).
(A) 3 సమయ పాయింట్ల వద్ద కుందేలు నడుము వెన్నెముక యొక్క ప్రతినిధి వరుస MRI చిత్రాలు. షామ్-ఆపరేషన్ సమూహం యొక్క చిత్రాలలో ఎటువంటి సిగ్నల్ అసాధారణతలు కనుగొనబడలేదు. (B) ME సమూహంలోని వెన్నుపూస యొక్క సిగ్నల్ లక్షణాలు షామ్-ఆపరేషన్ సమూహంలోని వాటిని పోలి ఉన్నాయి, మరియు కాలక్రమేణా ఎంబెడింగ్ ప్రదేశంలో ఎటువంటి ముఖ్యమైన సిగ్నల్ మార్పు గమనించబడలేదు. (C) NPE సమూహంలో, T1W సీక్వెన్స్‌లో తక్కువ సిగ్నల్ స్పష్టంగా కనిపిస్తుంది, మరియు T2W సీక్వెన్స్‌లో మిశ్రమ సిగ్నల్ మరియు తక్కువ సిగ్నల్ స్పష్టంగా కనిపిస్తాయి. 12 వారాల కాలం నుండి 20 వారాల కాలం వరకు, T2W సీక్వెన్స్‌లో తక్కువ సిగ్నల్స్ చుట్టూ ఉన్న చెదురుమదురు అధిక సిగ్నల్స్ తగ్గుతాయి.
NPE సమూహంలో వెన్నుపూస యొక్క ఇంప్లాంటేషన్ ప్రదేశంలో స్పష్టమైన ఎముక హైపర్‌ప్లాసియాను చూడవచ్చు మరియు NPE సమూహంతో పోలిస్తే 12 నుండి 20 వారాలలో ఎముక హైపర్‌ప్లాసియా వేగంగా సంభవిస్తుంది (Fig. 2C), నమూనా చేయబడిన వెన్నుపూసలలో ఎటువంటి గణనీయమైన మార్పు గమనించబడలేదు; షామ్ సమూహం మరియు ME సమూహం (Fig. 2C) 2A,B).
(A) ఇంప్లాంట్ చేసిన భాగంలో వెన్నుపూస ఉపరితలం చాలా నునుపుగా ఉంది, రంధ్రం బాగా మానింది, మరియు వెన్నుపూసలో హైపర్‌ప్లాసియా లేదు. (B) ME సమూహంలో ఇంప్లాంట్ చేసిన ప్రదేశం యొక్క ఆకారం షామ్ ఆపరేషన్ సమూహంలో ఉన్నదానిని పోలి ఉంది, మరియు కాలక్రమేణా ఇంప్లాంట్ చేసిన ప్రదేశం యొక్క స్వరూపంలో స్పష్టమైన మార్పు లేదు. (C) NPE సమూహంలో ఇంప్లాంట్ చేసిన ప్రదేశంలో ఎముక హైపర్‌ప్లాసియా సంభవించింది. ఎముక హైపర్‌ప్లాసియా వేగంగా పెరిగింది మరియు ఇంటర్‌వెర్టెబ్రల్ డిస్క్ గుండా అవతలి వైపు వెన్నుపూస వరకు కూడా విస్తరించింది.
హిస్టోలాజికల్ విశ్లేషణ ఎముక ఏర్పడటం గురించి మరింత వివరమైన సమాచారాన్ని అందిస్తుంది. చిత్రం 3, H&E తో రంగు వేయబడిన శస్త్రచికిత్స అనంతర విభాగాల ఫోటోలను చూపుతుంది. షామ్-ఆపరేషన్ సమూహంలో, కాండ్రోసైట్లు చక్కగా అమర్చబడి ఉన్నాయి మరియు కణాల విస్తరణ ఏదీ గుర్తించబడలేదు (చిత్రం 3A). ME సమూహంలోని పరిస్థితి షామ్-ఆపరేషన్ సమూహంలోని మాదిరిగానే ఉంది (చిత్రం 3B). అయితే, NPE సమూహంలో, ఇంప్లాంటేషన్ ప్రదేశంలో పెద్ద సంఖ్యలో కాండ్రోసైట్లు మరియు NP-వంటి కణాల విస్తరణ గమనించబడ్డాయి (చిత్రం 3C);
(A) ఎండ్ ప్లేట్ దగ్గర ట్రాబెక్యులే కనిపిస్తాయి, కాండ్రోసైట్లు ఏకరీతి కణ పరిమాణం మరియు ఆకారంతో చక్కగా అమర్చబడి ఉంటాయి మరియు ప్రొలిఫరేషన్ ఉండదు (40 రెట్లు). (B) ME సమూహంలో ఇంప్లాంటేషన్ ప్రదేశం యొక్క పరిస్థితి షామ్ సమూహం మాదిరిగానే ఉంటుంది. ట్రాబెక్యులే మరియు కాండ్రోసైట్లు కనిపిస్తాయి, కానీ ఇంప్లాంటేషన్ ప్రదేశంలో స్పష్టమైన ప్రొలిఫరేషన్ లేదు (40 రెట్లు). (B) కాండ్రోసైట్లు మరియు NP-వంటి కణాలు గణనీయంగా ప్రొలిఫరేట్ అవుతున్నాయని మరియు కాండ్రోసైట్ల ఆకారం మరియు పరిమాణం అసమానంగా ఉన్నాయని చూడవచ్చు (40 రెట్లు).
NPE మరియు ME రెండు సమూహాలలోనూ ఇంటర్‌ల్యూకిన్ 4 (IL-4) mRNA, ఇంటర్‌ల్యూకిన్ 17 (IL-17) mRNA, మరియు ఇంటర్‌ఫెరాన్ γ (IFN-γ) mRNA యొక్క వ్యక్తీకరణను గమనించారు. లక్ష్య జన్యువుల వ్యక్తీకరణ స్థాయిలను పోల్చినప్పుడు, ME సమూహం మరియు షామ్ ఆపరేషన్ సమూహంతో పోలిస్తే NPE సమూహంలో IL-4, IL-17, మరియు IFN-γ యొక్క జన్యు వ్యక్తీకరణలు గణనీయంగా పెరిగాయి (Fig. 4) (P < 0.05). షామ్ ఆపరేషన్ సమూహంతో పోలిస్తే, ME సమూహంలో IL-4, IL-17, మరియు IFN-γ యొక్క వ్యక్తీకరణ స్థాయిలు స్వల్పంగా మాత్రమే పెరిగాయి మరియు గణాంక మార్పును చేరుకోలేదు (P > 0.05).
NPE సమూహంలో IL-4, IL-17 మరియు IFN-γ యొక్క mRNA వ్యక్తీకరణ షామ్ ఆపరేషన్ సమూహం మరియు ME సమూహం కంటే గణనీయంగా అధిక ధోరణిని చూపించింది (P < 0.05).
దీనికి విరుద్ధంగా, ME సమూహంలో వ్యక్తీకరణ స్థాయిలు గణనీయమైన వ్యత్యాసాన్ని చూపించలేదు (P>0.05).
మార్పు చెందిన mRNA వ్యక్తీకరణ నమూనాను నిర్ధారించడానికి, IL-4 మరియు IL-17 లకు వ్యతిరేకంగా వాణిజ్యపరంగా లభించే యాంటీబాడీలను ఉపయోగించి వెస్టర్న్ బ్లాట్ విశ్లేషణ నిర్వహించబడింది. చిత్రాలు 5A,B లో చూపిన విధంగా, ME సమూహం మరియు షామ్ ఆపరేషన్ సమూహంతో పోలిస్తే, NPE సమూహంలో IL-4 మరియు IL-17 యొక్క ప్రోటీన్ స్థాయిలు గణనీయంగా పెరిగాయి (P < 0.05). షామ్ ఆపరేషన్ సమూహంతో పోలిస్తే, ME సమూహంలో IL-4 మరియు IL-17 యొక్క ప్రోటీన్ స్థాయిలు కూడా గణాంకపరంగా ముఖ్యమైన మార్పులను చేరుకోలేకపోయాయి (P> 0.05).
(A) NPE సమూహంలో IL-4 మరియు IL-17 యొక్క ప్రోటీన్ స్థాయిలు ME సమూహం మరియు ప్లేసిబో సమూహం కంటే గణనీయంగా ఎక్కువగా ఉన్నాయి (P < 0.05). (B) వెస్ట్రన్ బ్లాట్ హిస్టోగ్రామ్.
శస్త్రచికిత్స సమయంలో లభించిన మానవ నమూనాల సంఖ్య పరిమితంగా ఉండటం వలన, MC యొక్క వ్యాధిజననంపై స్పష్టమైన మరియు వివరణాత్మక అధ్యయనాలు చేయడం కొంత కష్టంగా ఉంది. దాని సంభావ్య వ్యాధి సంబంధిత యంత్రాంగాలను అధ్యయనం చేయడానికి మేము MC యొక్క జంతు నమూనాను స్థాపించడానికి ప్రయత్నించాము. అదే సమయంలో, NP ఆటోగ్రాఫ్ట్ ద్వారా ప్రేరేపించబడిన MC యొక్క గమనాన్ని అనుసరించడానికి రేడియాలజికల్ మూల్యాంకనం, హిస్టోలాజికల్ మూల్యాంకనం మరియు మాలిక్యులర్ బయోలాజికల్ మూల్యాంకనం ఉపయోగించబడ్డాయి. ఫలితంగా, NP ఇంప్లాంటేషన్ నమూనా 12వ వారం నుండి 20వ వారం సమయాల మధ్య సిగ్నల్ తీవ్రతలో క్రమమైన మార్పుకు దారితీసింది (T1W సీక్వెన్సులలో మిశ్రమ తక్కువ సిగ్నల్ మరియు T2W సీక్వెన్సులలో తక్కువ సిగ్నల్), ఇది కణజాల మార్పులను సూచిస్తుంది, మరియు హిస్టోలాజికల్ మరియు మాలిక్యులర్ బయోలాజికల్ మూల్యాంకనాలు రేడియాలజికల్ అధ్యయనం యొక్క ఫలితాలను ధృవీకరించాయి.
ఈ ప్రయోగ ఫలితాలు NPE సమూహంలో వెన్నుపూస దెబ్బతిన్న ప్రదేశంలో దృశ్య మరియు కణజాల మార్పులు సంభవించాయని చూపిస్తున్నాయి. అదే సమయంలో, IL-4, IL-17 మరియు IFN-γ జన్యువుల వ్యక్తీకరణ, అలాగే IL-4, IL-17 మరియు IFN-γ ల వ్యక్తీకరణ కూడా గమనించబడింది. ఇది వెన్నుపూసలోని స్వయంజనిత న్యూక్లియస్ పల్పోసస్ కణజాలం దెబ్బతినడం వలన సంకేత మరియు స్వరూప మార్పుల శ్రేణి సంభవించవచ్చని సూచిస్తుంది. జంతు నమూనా యొక్క వెన్నుపూసల సంకేత లక్షణాలు (T1W క్రమంలో తక్కువ సంకేతం, T2W క్రమంలో మిశ్రమ సంకేతం మరియు తక్కువ సంకేతం) మానవ వెన్నుపూస కణాల లక్షణాలను చాలా పోలి ఉన్నాయని సులభంగా కనుగొనవచ్చు. మరియు MRI లక్షణాలు కూడా కణజాల శాస్త్రం మరియు స్థూల శరీర నిర్మాణ శాస్త్ర పరిశీలనలను ధృవీకరిస్తాయి, అంటే వెన్నుపూస కణాలలో మార్పులు క్రమంగా జరుగుతాయి. తీవ్రమైన గాయం వలన కలిగే వాపు ప్రతిస్పందన పంక్చర్ చేసిన వెంటనే కనిపించినప్పటికీ, MRI ఫలితాలు పంక్చర్ చేసిన 12 వారాల తర్వాత క్రమంగా పెరుగుతున్న సిగ్నల్ మార్పులు కనిపించాయని మరియు MRI మార్పులలో కోలుకోవడం లేదా తిరోగమనం యొక్క ఎటువంటి సంకేతాలు లేకుండా 20 వారాల వరకు కొనసాగాయని చూపించాయి. ఈ ఫలితాలు కుందేళ్ళలో ప్రగతిశీల MVని స్థాపించడానికి ఆటోలోగస్ వెర్టెబ్రల్ NP ఒక నమ్మదగిన పద్ధతి అని సూచిస్తున్నాయి.
ఈ పంక్చర్ నమూనాకు తగిన నైపుణ్యం, సమయం మరియు శస్త్రచికిత్స కృషి అవసరం. ప్రాథమిక ప్రయోగాలలో, పారావెర్టెబ్రల్ లిగమెంటస్ నిర్మాణాలను విడదీయడం లేదా అధికంగా ప్రేరేపించడం వల్ల వెర్టెబ్రల్ ఆస్టియోఫైట్స్ ఏర్పడవచ్చు. ప్రక్కనే ఉన్న డిస్క్‌లకు నష్టం లేదా చికాకు కలిగించకుండా జాగ్రత్త తీసుకోవాలి. స్థిరమైన మరియు పునరావృతమయ్యే ఫలితాలను పొందడానికి చొచ్చుకుపోయే లోతును నియంత్రించాల్సి ఉన్నందున, మేము 3 మిమీ పొడవున్న సూది యొక్క తొడుగును కత్తిరించి చేతితో ఒక ప్లగ్‌ను తయారు చేశాము. ఈ ప్లగ్‌ను ఉపయోగించడం వల్ల వెర్టెబ్రల్ బాడీలో ఏకరీతి డ్రిల్లింగ్ లోతు ఉండేలా చూసుకోవచ్చు. ప్రాథమిక ప్రయోగాలలో, ఆపరేషన్‌లో పాల్గొన్న ముగ్గురు ఆర్థోపెడిక్ సర్జన్లు 18-గేజ్ సూదులు లేదా ఇతర పద్ధతుల కంటే 16-గేజ్ సూదులతో పనిచేయడం సులభమని కనుగొన్నారు. డ్రిల్లింగ్ సమయంలో అధిక రక్తస్రావాన్ని నివారించడానికి, సూదిని కొంతసేపు కదలకుండా పట్టుకోవడం మరింత అనువైన చొప్పించే రంధ్రాన్ని అందిస్తుంది, ఈ విధంగా కొంతవరకు MCని నియంత్రించవచ్చని ఇది సూచిస్తుంది.
MCని లక్ష్యంగా చేసుకుని అనేక అధ్యయనాలు జరిగినప్పటికీ, MC యొక్క కారణాలు మరియు వ్యాధిజననం గురించి చాలా తక్కువగా తెలుసు25,26,27. మా మునుపటి అధ్యయనాల ఆధారంగా, MC సంభవించడంలో మరియు అభివృద్ధి చెందడంలో ఆటోఇమ్యూనిటీ కీలక పాత్ర పోషిస్తుందని మేము కనుగొన్నాము12. ఈ అధ్యయనం యాంటిజెన్ ప్రేరణ తర్వాత CD4+ కణాల యొక్క ప్రధాన భేదక మార్గాలైన IL-4, IL-17, మరియు IFN-γ యొక్క పరిమాణాత్మక వ్యక్తీకరణను పరిశీలించింది. మా అధ్యయనంలో, నెగటివ్ గ్రూప్‌తో పోలిస్తే, NPE గ్రూప్‌లో IL-4, IL-17, మరియు IFN-γ యొక్క వ్యక్తీకరణ ఎక్కువగా ఉంది, మరియు IL-4 మరియు IL-17 యొక్క ప్రోటీన్ స్థాయిలు కూడా ఎక్కువగా ఉన్నాయి.
క్లినికల్‌గా, డిస్క్ హెర్నియేషన్ ఉన్న రోగుల NP కణాలలో IL-17 mRNA వ్యక్తీకరణ పెరుగుతుంది28. ఆరోగ్యకరమైన నియంత్రణలతో పోలిస్తే తీవ్రమైన నాన్-కంప్రెసివ్ డిస్క్ హెర్నియేషన్ నమూనాలో IL-4 మరియు IFN-γ వ్యక్తీకరణ స్థాయిలు కూడా పెరిగినట్లు కనుగొనబడింది29. IL-17 ఆటోఇమ్యూన్ వ్యాధులలో వాపు, కణజాల గాయంలో కీలక పాత్ర పోషిస్తుంది30 మరియు IFN-γ కు రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనను పెంచుతుంది31. MRL/lpr ఎలుకలలో32 మరియు ఆటోఇమ్యూనిటీ-సున్నితమైన ఎలుకలలో33 IL-17-మధ్యవర్తిత్వ కణజాల గాయం పెరిగినట్లు నివేదించబడింది. IL-4 ప్రోఇన్‌ఫ్లమేటరీ సైటోకైన్‌ల (IL-1β మరియు TNFα వంటివి) వ్యక్తీకరణను మరియు మాక్రోఫేజ్ యాక్టివేషన్‌ను నిరోధించగలదు34. అదే సమయ బిందువు వద్ద IL-17 మరియు IFN-γ లతో పోలిస్తే NPE సమూహంలో IL-4 యొక్క mRNA వ్యక్తీకరణ భిన్నంగా ఉందని నివేదించబడింది; NPE సమూహంలో IFN-γ యొక్క mRNA వ్యక్తీకరణ ఇతర సమూహాల కంటే గణనీయంగా ఎక్కువగా ఉంది. అందువల్ల, NP ఇంటర్‌కలేషన్ ద్వారా ప్రేరేపించబడిన తాపజనక ప్రతిస్పందనకు IFN-γ ఉత్పత్తి ఒక మధ్యవర్తి కావచ్చు. క్రియాశీలక టైప్ 1 హెల్పర్ T కణాలు, సహజ కిల్లర్ కణాలు మరియు మాక్రోఫేజ్‌లతో సహా బహుళ కణ రకాల ద్వారా IFN-γ ఉత్పత్తి చేయబడుతుందని అధ్యయనాలు చూపించాయి35,36 మరియు ఇది రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనలను ప్రోత్సహించే ఒక కీలకమైన ప్రో-ఇన్‌ఫ్లమేటరీ సైటోకైన్37.
MC యొక్క సంభవం మరియు అభివృద్ధిలో ఆటోఇమ్యూన్ ప్రతిస్పందన పాత్ర ఉండవచ్చని ఈ అధ్యయనం సూచిస్తుంది. లూమా మరియు ఇతరులు, MRIలో MC మరియు ప్రముఖ NP యొక్క సిగ్నల్ లక్షణాలు ఒకే విధంగా ఉన్నాయని, మరియు రెండూ T2W సీక్వెన్స్‌లో అధిక సిగ్నల్‌ను చూపుతాయని కనుగొన్నారు38. IL-139 వంటి కొన్ని సైటోకైన్‌లు MC సంభవించడంతో దగ్గరి సంబంధం కలిగి ఉన్నాయని నిర్ధారించబడింది. మా మరియు ఇతరులు, NP యొక్క పైకి లేదా క్రిందికి పొడుచుకురావడం MC యొక్క సంభవం మరియు అభివృద్ధిపై గొప్ప ప్రభావాన్ని చూపవచ్చని సూచించారు12. బోబెచ్కో40 మరియు హెర్జ్‌బీన్ మరియు ఇతరులు41, NP అనేది పుట్టుక నుండి రక్త ప్రసరణలోకి ప్రవేశించలేని ఒక ఇమ్యునోటోలరెంట్ కణజాలం అని నివేదించారు. NP పొడుచుకురావడం వల్ల రక్త సరఫరాలోకి బాహ్య పదార్థాలు ప్రవేశించి, తద్వారా స్థానిక ఆటోఇమ్యూన్ ప్రతిచర్యలకు మధ్యవర్తిత్వం వహిస్తాయి42. ఆటోఇమ్యూన్ ప్రతిచర్యలు పెద్ద సంఖ్యలో రోగనిరోధక కారకాలను ప్రేరేపించగలవు, మరియు ఈ కారకాలు నిరంతరం కణజాలాలకు గురైనప్పుడు, అవి సిగ్నలింగ్‌లో మార్పులకు కారణమవుతాయి43. ఈ అధ్యయనంలో, IL-4, IL-17 మరియు IFN-γ యొక్క అధిక వ్యక్తీకరణ విలక్షణమైన రోగనిరోధక కారకాలుగా ఉన్నాయి, ఇది NP మరియు MCల మధ్య ఉన్న సన్నిహిత సంబంధాన్ని మరింతగా రుజువు చేస్తుంది44. ఈ జంతు నమూనా, NP విచ్ఛిన్నం చెంది ఎండ్ ప్లేట్‌లోకి ప్రవేశించడాన్ని చక్కగా అనుకరిస్తుంది. ఈ ప్రక్రియ MC పై ఆటోఇమ్యూనిటీ ప్రభావాన్ని మరింతగా వెల్లడించింది.
ఊహించినట్లుగానే, ఈ జంతు నమూనా MCని అధ్యయనం చేయడానికి మనకు ఒక సాధ్యమైన వేదికను అందిస్తుంది. అయితే, ఈ నమూనాకు ఇంకా కొన్ని పరిమితులు ఉన్నాయి: మొదటిది, జంతు పరిశీలన దశలో, కొన్ని మధ్యస్థ-దశ కుందేళ్ళను హిస్టోలాజికల్ మరియు మాలిక్యులర్ బయాలజీ పరీక్షల కోసం దయతో చంపవలసి ఉంటుంది, కాబట్టి కాలక్రమేణా కొన్ని జంతువులు "ఉపయోగంలో లేకుండా పోతాయి". రెండవది, ఈ అధ్యయనంలో మూడు సమయ బిందువులను నిర్దేశించినప్పటికీ, దురదృష్టవశాత్తు, మనం కేవలం ఒక రకమైన MC (మోడిక్ టైప్ I మార్పు)ని మాత్రమే నమూనాగా తీసుకున్నాము, కాబట్టి ఇది మానవ వ్యాధి అభివృద్ధి ప్రక్రియను సూచించడానికి సరిపోదు, మరియు అన్ని సంకేత మార్పులను మెరుగ్గా గమనించడానికి మరిన్ని సమయ బిందువులను నిర్దేశించాల్సిన అవసరం ఉంది. మూడవది, కణజాల నిర్మాణంలోని మార్పులను హిస్టోలాజికల్ స్టెయినింగ్ ద్వారా స్పష్టంగా చూపవచ్చు, కానీ కొన్ని ప్రత్యేక సాంకేతికతలు ఈ నమూనాలోని సూక్ష్మ నిర్మాణ మార్పులను మరింత మెరుగ్గా వెల్లడిస్తాయి. ఉదాహరణకు, కుందేలు వెన్నుపూసల మధ్య డిస్కులలో ఫైబ్రోకార్టిలేజ్ ఏర్పడటాన్ని విశ్లేషించడానికి పోలరైజ్డ్ లైట్ మైక్రోస్కోపీని ఉపయోగించారు45. MC మరియు ఎండ్‌ప్లేట్‌పై NP యొక్క దీర్ఘకాలిక ప్రభావాలపై మరింత అధ్యయనం అవసరం.
యాభై నాలుగు మగ న్యూజిలాండ్ తెల్ల కుందేళ్ళను (బరువు సుమారు 2.5-3 కిలోలు, వయస్సు 3-3.5 నెలలు) యాదృచ్ఛికంగా షామ్ ఆపరేషన్ గ్రూప్, కండరాల ఇంప్లాంటేషన్ గ్రూప్ (ME గ్రూప్) మరియు నరాల మూలాల ఇంప్లాంటేషన్ గ్రూప్ (NPE గ్రూప్) గా విభజించారు. అన్ని ప్రయోగాత్మక విధానాలను టియాంజిన్ హాస్పిటల్ ఎథిక్స్ కమిటీ ఆమోదించింది మరియు ప్రయోగాత్మక పద్ధతులను ఆమోదించబడిన మార్గదర్శకాలకు కచ్చితంగా అనుగుణంగా నిర్వహించారు.
ఎస్. సోబాజిమా 46 యొక్క శస్త్రచికిత్సా విధానంలో కొన్ని మెరుగుదలలు చేయబడ్డాయి. ప్రతి కుందేలును ఒక పక్కకు పడుకోబెట్టి, పోస్టెరోలేటరల్ రెట్రోపెరిటోనియల్ విధానాన్ని ఉపయోగించి వరుసగా ఉన్న ఐదు కటి వెన్నుపూసల మధ్య డిస్క్‌ల (IVDలు) ముందు ఉపరితలాన్ని బహిర్గతం చేశారు. ప్రతి కుందేలుకు సాధారణ అనస్థీషియా (20% యురేథేన్, చెవి సిర ద్వారా 5 మి.లీ/కి.గ్రా) ఇచ్చారు. పక్కటెముకల దిగువ అంచు నుండి కటి అంచు వరకు, పారావెర్టెబ్రల్ కండరాలకు 2 సెం.మీ దిగువన, చర్మంపై నిలువు కోత పెట్టారు. పైన ఉన్న చర్మం కింద కణజాలం, రెట్రోపెరిటోనియల్ కణజాలం మరియు కండరాలను పదునైన మరియు మొద్దుబారిన కోతలతో విడదీయడం ద్వారా L1 నుండి L6 వరకు కుడి ఆంటెరోలేటరల్ వెన్నుపూసను బహిర్గతం చేశారు (పటం 6A). L5-L6 డిస్క్ స్థాయికి కటి అంచును శరీర నిర్మాణ సంబంధమైన మైలురాయిగా ఉపయోగించి డిస్క్ స్థాయిని నిర్ధారించారు. L5 వెన్నుపూస యొక్క ఎండ్ ప్లేట్ దగ్గర 3 మి.మీ లోతుకు రంధ్రం చేయడానికి 16-గేజ్ పంక్చర్ సూదిని ఉపయోగించండి (పటం 6B). L1-L2 ఇంటర్‌వెర్టెబ్రల్ డిస్క్‌లోని ఆటోలోగస్ న్యూక్లియస్ పల్పోసస్‌ను ఆస్పిరేట్ చేయడానికి 5-మి.లీ. సిరంజిని ఉపయోగించండి (పటం 6C). ప్రతి సమూహం యొక్క అవసరాలకు అనుగుణంగా న్యూక్లియస్ పల్పోసస్ లేదా కండరాన్ని తొలగించండి. డ్రిల్ రంధ్రం లోతుగా చేసిన తర్వాత, శస్త్రచికిత్స సమయంలో వెన్నుపూస యొక్క పెరియోస్టియల్ కణజాలానికి నష్టం జరగకుండా జాగ్రత్త తీసుకుంటూ, డీప్ ఫాసియా, సూపర్ఫిషియల్ ఫాసియా మరియు చర్మంపై కరిగిపోయే కుట్లు వేయాలి.
(A) పోస్టెరోలేటరల్ రెట్రోపెరిటోనియల్ విధానం ద్వారా L5–L6 డిస్క్ బహిర్గతం చేయబడుతుంది. (B) L5 ఎండ్‌ప్లేట్ దగ్గర రంధ్రం చేయడానికి 16-గేజ్ సూదిని ఉపయోగించండి. (C) ఆటోలోగస్ MFలు సేకరించబడతాయి.
చెవి సిర ద్వారా 20% యురేథేన్ (5 మి.లీ/కిలో) తో జనరల్ అనస్థీషియా ఇవ్వబడింది మరియు శస్త్రచికిత్స తర్వాత 12, 16, మరియు 20 వారాలకు కటి వెన్నెముక రేడియోగ్రాఫ్‌లు పునరావృతం చేయబడ్డాయి.
శస్త్రచికిత్స జరిగిన 12, 16 మరియు 20 వారాల తర్వాత, కుందేళ్ళను కండరాల ద్వారా కెటమైన్ (25.0 mg/kg) ఇంజెక్షన్ మరియు సిరల ద్వారా సోడియం పెంటోబార్బిటాల్ (1.2 g/kg) ఇచ్చి బలిచ్చారు. హిస్టోలాజికల్ విశ్లేషణ కోసం మొత్తం వెన్నెముకను తొలగించి, వాస్తవ విశ్లేషణను నిర్వహించారు. రోగనిరోధక కారకాలలోని మార్పులను గుర్తించడానికి క్వాంటిటేటివ్ రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ (RT-qPCR) మరియు వెస్టర్న్ బ్లాటింగ్ పద్ధతులను ఉపయోగించారు.
ఆర్థోగోనల్ లింబ్ కాయిల్ రిసీవర్‌తో కూడిన 3.0 T క్లినికల్ మాగ్నెట్ (GE మెడికల్ సిస్టమ్స్, ఫ్లోరెన్స్, SC) ఉపయోగించి కుందేళ్ళలో MRI పరీక్షలు నిర్వహించబడ్డాయి. కుందేళ్ళకు చెవి సిర ద్వారా 20% యురేథేన్ (5 mL/kg) ఇచ్చి మత్తు కలిగించి, ఆ తర్వాత వాటి నడుము భాగాన్ని 5-అంగుళాల వ్యాసం గల వృత్తాకార సర్ఫేస్ కాయిల్ (GE మెడికల్ సిస్టమ్స్) మీద కేంద్రీకరించి మాగ్నెట్ లోపల వెల్లకిలా పడుకోబెట్టారు. L3–L4 నుండి L5–L6 వరకు ఉన్న నడుము డిస్క్ యొక్క స్థానాన్ని నిర్వచించడానికి కరోనల్ T2-వెయిటెడ్ లోకలైజర్ చిత్రాలు (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) తీయబడ్డాయి. సాజిటల్ ప్లేన్ T2-వెయిటెడ్ స్లైస్‌లు ఈ క్రింది సెట్టింగ్‌లతో తీయబడ్డాయి: రిపీటేషన్ టైమ్ (TR) 2200 ms మరియు ఎకో టైమ్ (TE) 70 ms ఉన్న ఫాస్ట్ స్పిన్-ఎకో సీక్వెన్స్, మ్యాట్రిక్స్; విజువల్ ఫీల్డ్ 260 మరియు ఎనిమిది స్టిమ్యులీ; కటింగ్ మందం 2 mm, గ్యాప్ 0.2 mm.
చివరి ఫోటో తీసి, చివరి కుందేలును చంపిన తర్వాత, హిస్టోలాజికల్ పరీక్ష కోసం షామ్, మజిల్-ఎంబెడెడ్, మరియు NP డిస్క్‌లను తొలగించారు. కణజాలాలను 10% న్యూట్రల్ బఫర్డ్ ఫార్మాలిన్‌లో 1 వారం పాటు ఫిక్స్ చేసి, ఇథిలీన్‌డయామినోటెట్రాసిటిక్ యాసిడ్‌తో డీకాల్సిఫై చేసి, పారాఫిన్ సెక్షన్లుగా కత్తిరించారు. కణజాలపు బ్లాక్‌లను పారాఫిన్‌లో ఎంబెడ్ చేసి, మైక్రోటోమ్‌ను ఉపయోగించి సాజిటల్ సెక్షన్లుగా (5 μm మందం) కత్తిరించారు. సెక్షన్లకు హెమటాక్సిలిన్ మరియు ఇయోసిన్ (H&E) తో రంగు వేశారు.
ప్రతి సమూహంలోని కుందేళ్ళ నుండి ఇంటర్‌వెర్టెబ్రల్ డిస్క్‌లను సేకరించిన తర్వాత, తయారీదారు సూచనల ప్రకారం UNIQ-10 కాలమ్ (షాంఘై సాంగోన్ బయోటెక్నాలజీ కో., లిమిటెడ్, చైనా) మరియు ImProm II రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ సిస్టమ్ (ప్రోమెగా ఇంక్., మాడిసన్, WI, USA) ఉపయోగించి మొత్తం RNAని సంగ్రహించి, రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ నిర్వహించబడింది.
తయారీదారు సూచనల ప్రకారం ప్రిజం 7300 (అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్ ఇంక్., USA) మరియు SYBR గ్రీన్ జంప్ స్టార్ట్ టాక్ రెడీమిక్స్ (సిగ్మా-ఆల్డ్రిచ్, సెయింట్ లూయిస్, MO, USA) ఉపయోగించి RT-qPCR నిర్వహించబడింది. PCR రియాక్షన్ పరిమాణం 20 μl మరియు ఇందులో 1.5 μl పలుచన చేసిన cDNA మరియు ప్రతి ప్రైమర్ 0.2 μM ఉన్నాయి. ప్రైమర్‌లను ఒలిగోపర్ఫెక్ట్ డిజైనర్ (ఇన్విట్రోజెన్, వాలెన్సియా, CA) ద్వారా రూపొందించారు మరియు నాన్జింగ్ గోల్డెన్ స్టీవార్ట్ బయోటెక్నాలజీ కో., లిమిటెడ్ (చైనా) ద్వారా తయారు చేయబడ్డాయి (పట్టిక 1). ఈ క్రింది థర్మల్ సైక్లింగ్ పరిస్థితులను ఉపయోగించారు: ప్రారంభ పాలిమరేస్ యాక్టివేషన్ దశ 94°C వద్ద 2 నిమిషాల పాటు, ఆ తర్వాత టెంప్లేట్ డినాచురేషన్ కోసం 94°C వద్ద 15 సెకన్ల చొప్పున 40 సైకిల్స్, 60°C వద్ద 1 నిమిషం పాటు ఎనీలింగ్, ఎక్స్‌టెన్షన్ మరియు ఫ్లోరోసెన్స్. కొలతలను 72°C వద్ద 1 నిమిషం పాటు నిర్వహించారు. అన్ని నమూనాలను మూడుసార్లు యాంప్లిఫై చేసి, వాటి సగటు విలువను RT-qPCR విశ్లేషణ కోసం ఉపయోగించారు. యాంప్లిఫికేషన్ డేటాను ఫ్లెక్స్‌స్టేషన్ 3 (మాలిక్యులర్ డివైసెస్, సన్నీవేల్, CA, USA) ఉపయోగించి విశ్లేషించారు. IL-4, IL-17, మరియు IFN-γ జన్యు వ్యక్తీకరణను ఎండోజెనస్ కంట్రోల్ (ACTB)కు నార్మలైజ్ చేశారు. టార్గెట్ mRNA యొక్క సాపేక్ష వ్యక్తీకరణ స్థాయిలను 2-ΔΔCT పద్ధతిని ఉపయోగించి లెక్కించారు.
RIPA లైసిస్ బఫర్ (ప్రోటీయేస్ మరియు ఫాస్ఫటేస్ ఇన్హిబిటర్ కాక్‌టెయిల్‌ను కలిగి ఉన్నది)లో టిష్యూ హోమోజనైజర్‌ను ఉపయోగించి కణజాలాల నుండి మొత్తం ప్రోటీన్‌ను సంగ్రహించారు, ఆపై కణజాల శిధిలాలను తొలగించడానికి 4°C వద్ద 20 నిమిషాల పాటు 13,000 rpm వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేశారు. ఒక్కో లేన్‌కు యాభై మైక్రోగ్రాముల ప్రోటీన్‌ను లోడ్ చేసి, 10% SDS-PAGE ద్వారా వేరు చేసి, ఆపై PVDF పొరపైకి బదిలీ చేశారు. గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 1 గంట పాటు 0.1% ట్వీన్ 20 కలిగిన ట్రిస్-బఫర్డ్ సెలైన్ (TBS)లో 5% నాన్‌ఫ్యాట్ డ్రై మిల్క్‌లో బ్లాకింగ్ చేశారు. ఆ పొరను రాబిట్ యాంటీ-డెకోరిన్ ప్రైమరీ యాంటీబాడీ (1:200 నిష్పత్తిలో పలుచన చేయబడింది; బోస్టర్, వుహాన్, చైనా) (1:200 నిష్పత్తిలో పలుచన చేయబడింది; బయోస్, బీజింగ్, చైనా)తో 4°C వద్ద రాత్రంతా ఇంక్యుబేట్ చేసి, రెండవ రోజున చర్య జరిపారు; సెకండరీ యాంటీబాడీ (1:40,000 విలీనంలో గోట్ యాంటీ-రాబిట్ ఇమ్యునోగ్లోబులిన్ G)ని హార్స్‌రాడిష్ పెరాక్సిడేజ్ (బోస్టర్, వుహాన్, చైనా)తో కలిపి గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 1 గంట పాటు ఉంచారు. ఎక్స్-రే ఇర్రేడియేషన్ తర్వాత కెమిల్యూమినెసెంట్ మెంబ్రేన్‌పై పెరిగిన కెమిల్యూమినెసెన్స్ ద్వారా వెస్ట్రన్ బ్లాట్ సిగ్నల్స్ గుర్తించబడ్డాయి. డెన్సిటోమెట్రిక్ విశ్లేషణ కోసం, బ్లాట్‌లను బ్యాండ్‌స్కాన్ సాఫ్ట్‌వేర్‌ను ఉపయోగించి స్కాన్ చేసి, పరిమాణీకరించారు మరియు ఫలితాలను టార్గెట్ జీన్ ఇమ్యునోరియాక్టివిటీకి ట్యూబులిన్ ఇమ్యునోరియాక్టివిటీకి గల నిష్పత్తిగా వ్యక్తీకరించారు.
గణాంక గణనలను SPSS16.0 సాఫ్ట్‌వేర్ ప్యాకేజీ (SPSS, USA) ఉపయోగించి నిర్వహించారు. అధ్యయనం సమయంలో సేకరించిన డేటాను సగటు ± ప్రామాణిక విచలనం (సగటు ± SD) రూపంలో వ్యక్తీకరించారు మరియు రెండు సమూహాల మధ్య తేడాలను నిర్ధారించడానికి వన్-వే రిపీటెడ్ మెజర్స్ అనాలిసిస్ ఆఫ్ వేరియెన్స్ (ANOVA) ఉపయోగించి విశ్లేషించారు. P < 0.05 ను గణాంకపరంగా ముఖ్యమైనదిగా పరిగణించారు.
అందువల్ల, వెన్నుపూస శరీరంలోకి ఆటోలోగస్ NPలను ఇంప్లాంట్ చేయడం ద్వారా MC యొక్క జంతు నమూనాను స్థాపించడం మరియు స్థూల శరీర నిర్మాణ పరిశీలన, MRI విశ్లేషణ, హిస్టోలాజికల్ మూల్యాంకనం మరియు మాలిక్యులర్ బయోలాజికల్ విశ్లేషణలను నిర్వహించడం అనేది మానవ MC యొక్క యంత్రాంగాలను అంచనా వేయడానికి మరియు అర్థం చేసుకోవడానికి, అలాగే కొత్త చికిత్సా విధానాలను అభివృద్ధి చేయడానికి ఒక ముఖ్యమైన సాధనంగా మారవచ్చు.
ఈ వ్యాసాన్ని ఎలా ఉదహరించాలి: హాన్, సి. మరియు ఇతరులు. కటి వెన్నెముక యొక్క సబ్‌కాండ్రల్ ఎముకలోకి ఆటోలోగస్ న్యూక్లియస్ పల్పోసస్‌ను అమర్చడం ద్వారా మోడిక్ మార్పుల జంతు నమూనా స్థాపించబడింది. సై. రెప్. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
వైషాప్ట్, డి., జానెట్టి, ఎం., హోడ్లర్, జె., మరియు బూస్, ఎన్. కటి వెన్నెముక యొక్క మాగ్నెటిక్ రెసొనెన్స్ ఇమేజింగ్: లక్షణాలు లేని వాలంటీర్లలో డిస్క్ హెర్నియేషన్ మరియు రిటెన్షన్, నరాల మూల సంపీడనం, ఎండ్ ప్లేట్ అసాధారణతలు మరియు ఫేసెట్ జాయింట్ ఆస్టియో ఆర్థరైటిస్ యొక్క ప్రాబల్యం. రేడియాలజీ 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
కెజెర్, పి., కోర్షోల్మ్, ఎల్., బెండిక్స్, టి., సోరెన్సెన్, జెఎస్, మరియు లెబోఫ్-ఈడ్, కె. మోడిక్ మార్పులు మరియు క్లినికల్ ఫలితాలతో వాటి సంబంధం. యూరోపియన్ స్పైన్ జర్నల్: యూరోపియన్ స్పైన్ సొసైటీ, యూరోపియన్ సొసైటీ ఆఫ్ స్పైనల్ డిఫార్మిటీ, మరియు యూరోపియన్ సొసైటీ ఫర్ సెర్వికల్ స్పైన్ రీసెర్చ్ యొక్క అధికారిక ప్రచురణ 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
కుయిస్మా, ఎం., మరియు ఇతరులు. నడుము వెన్నెముక చివరి పలకలలో మోడిక్ మార్పులు: మధ్య వయస్కులైన పురుష కార్మికులలో ప్రాబల్యం మరియు నడుము నొప్పి మరియు సయాటికాతో సంబంధం. స్పైనీ 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
డి రూస్, ఎ., క్రెస్సెల్, హెచ్., స్ప్రైట్జర్, కె., మరియు డాలింకా, ఎం. కటి వెన్నెముక క్షీణత వ్యాధిలో ఎండ్ ప్లేట్ సమీపంలోని ఎముక మజ్జ మార్పుల MRI. AJR. అమెరికన్ జర్నల్ ఆఫ్ రేడియాలజీ 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
మోడిక్, MT, స్టెయిన్‌బర్గ్, PM, రాస్, JS, మసరిక్, TJ, మరియు కార్టర్, JR క్షీణించిన డిస్క్ వ్యాధి: MRIతో వెన్నుపూస మజ్జ మార్పుల మూల్యాంకనం. రేడియాలజీ 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
మోడిక్, MT, మసరిక్, TJ, రాస్, JS, మరియు కార్టర్, JR క్షీణించిన డిస్క్ వ్యాధి యొక్క ఇమేజింగ్. రేడియాలజీ 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
జెన్సెన్, టిఎస్, మరియు ఇతరులు. సాధారణ జనాభాలో నియోవెర్టెబ్రల్ ఎండ్‌ప్లేట్ (మోడిక్) సిగ్నల్ మార్పుల అంచనా కారకాలు. యూరోపియన్ స్పైన్ జర్నల్: యూరోపియన్ స్పైన్ సొసైటీ, యూరోపియన్ సొసైటీ ఆఫ్ స్పైనల్ డిఫార్మిటీ, మరియు యూరోపియన్ సొసైటీ ఫర్ సెర్వికల్ స్పైన్ రీసెర్చ్ యొక్క అధికారిక ప్రచురణ, డివిజన్ 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
ఆల్బర్ట్, హెచ్‌బి మరియు మనిష్, కె. కటి డిస్క్ హెర్నియేషన్ తర్వాత మోడిక్ మార్పులు. యూరోపియన్ స్పైన్ జర్నల్: యూరోపియన్ స్పైన్ సొసైటీ, యూరోపియన్ సొసైటీ ఆఫ్ స్పైనల్ డిఫార్మిటీ మరియు యూరోపియన్ సొసైటీ ఫర్ సెర్వికల్ స్పైన్ రీసెర్చ్ యొక్క అధికారిక ప్రచురణ 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
కెర్తుల్లా, ఎల్., లుయోమా, కె., వెహ్మాస్, టి., గ్రోన్‌బ్లాడ్, ఎం., మరియు కాపా, ఇ. మోడిక్ టైప్ I మార్పులు వేగంగా అభివృద్ధి చెందుతున్న డిఫార్మేషనల్ డిస్క్ క్షీణతను అంచనా వేయగలవు: ఒక సంవత్సరం ప్రాస్పెక్టివ్ అధ్యయనం. యూరోపియన్ స్పైన్ జర్నల్ 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
హు, ZJ, జావో, FD, ఫాంగ్, XQ మరియు ఫ్యాన్, SW మోడిక్ మార్పులు: కటి డిస్క్ క్షీణతకు సాధ్యమయ్యే కారణాలు మరియు దోహదం. మెడికల్ హైపోథెసిస్ 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
క్రోక్, హెచ్‌వి ఇంటర్నల్ డిస్క్ రప్చర్. 50 సంవత్సరాలకు పైగా డిస్క్ ప్రోలాప్స్ సమస్యలు. స్పైన (ఫిలా పా 1976) 11, 650–653 (1986).